细胞周期试剂盒

简介:

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞周期可以分为四个时相:G1(DNA 合成前期);S 期 (DNA 合成期);G2 期(DNA 合成后期)和M 期(有丝分裂期)。根据染色体的倍数进行分类分为三个时相:G1 期、S期和 G2/M 期三个时相。

采用流式方法来检测细胞周期,简单又方便,常用DNA染料:碘化丙啶(propidium iodide,PI)和7-氨基 - 放线菌素D(7-amino-actinomycin D ,7-AAD),PI可以和双链DNA、RNA结合,因此实验中需要用RNase处理细胞。

名称 激发光 发射光 固定 RNA酶 常用通道 货号
PI 488/561nm 615nm YES YES PE FXP0211
7-AAD 488/561nm 635~675nm YES NO percp FXP031

实验操作:

实验tips:

1. 细胞悬液制备:组织细胞可以用含EDTA的0.25%的胰酶消化,推荐使用Accumax(Cat:AM-105);贴壁细胞、干细胞推荐使用Accutase(Cat:AT-104)。

2. 乙醇固定细胞:为了减少细胞粘连,将细胞悬液(细胞放在冰上)逐滴加到4倍体积预冷的95%乙醇里。固定2小时以上或者过夜。(过夜操作,可以将细胞悬液放置在-20℃)。

3. 染色时,避光。

4. PI具有很强的粘附性,容易形成细胞聚团,建议使用200目的筛网过滤后上机。。

5. 上机时,荧光通道设置为线性(lin)放大。

6. 收集数据时,注意去除粘连细胞。

数据分析实例:Jurkat细胞周期分析

FXP0211 PI细胞周期检测试剂盒流式图

图一: 根据FSC、SSC排除碎片,E1圈定细胞;

图二: 根据PI-H、PI-A排除粘连体,P2为单个细胞;

图三: G1、S、G2/M期分别如图;

FXP031 7-AAD细胞周期检测试剂盒流式图

图四: 根据FSC、SSC排除碎片,Ea1圈定细胞;

图五: 根据7-AAD-H、7-AAD-A排除粘连体,P2为单个细胞;

图六: G1、S、G2/M期分别如图;

产品list
产品货号 产品名称 规格
FXP021 PI细胞周期检测试剂盒 50T/100T/200T
FXP0211 PI细胞周期检测试剂盒(含RNase) 50T/100T/200T
FXP031 7-AAD细胞周期检测试剂盒 50T/100T/200T
FXP031 7-AAD细胞周期检测试剂盒(含RNase) 50T/100T/200T