诺奖聚焦Treg:流式检测如何解锁免疫平衡密码?

 

 

诺奖背后的 "免疫维和部队

 

2025 年诺贝尔生理学或医学奖授予坂口志文等三位科学家,表彰其发现调节性 T 细胞(Treg)及核心调控基因 Foxp3。这类 CD4+T 细胞通过 Foxp3 精准调控免疫耐受,既是自身免疫病的 "刹车",也是肿瘤免疫逃逸的 "帮凶"。

 

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从诺奖到实验台:Treg 检测的重要性不言而喻。在肿瘤免疫治疗(如 CAR-T)与自身免疫病研究中,其数量与功能变化是疗效评估、免疫监测的关键;而高质量的 Treg 流式检测,更是科研与临床转化中揭示免疫平衡机制的必由之路。

 

一、Treg流式检测全流程实操指南

 

  1. 样本制备与预处理(分样本类型优化)

 

2.染色操作流程

 

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二、Treg 亚群精细分型与功能解码

 

 

三、实验要点

 

1、抗体克隆号的选择

选择实验用抗体时,需重点关注抗体克隆号。尤其针对持续表达或低丰度表达的标志物,克隆号的合理选择对实验成功至关重要。针对不同物种及标志物的推荐克隆号如下:

Human CD25:推荐克隆号 M-A251、BC96*

Human Foxp3:推荐克隆号 PCH101*

Human/Mouse CD44:推荐克隆号 IM7*

Mouse CD62L:推荐克隆号 MEL-14*

Mouse CD25:推荐克隆号 PC61.5*

Mouse Foxp3:推荐克隆号 FJK-16s

注:标 “*” 的克隆号,四正柏品牌均有现货供应,可直接选用。

 

2、固定与核膜通透(破膜)处理

Foxp3 与 T-Bet 均为核内蛋白,其检测需先通过固定、破核膜处理使抗体进入细胞核,因此固定 - 破膜套装的选择尤为关键。若破膜效果不佳,不仅会导致 Foxp3 与 T-Bet 的染色信号显著劣化,甚至可能导致目标蛋白无法被有效识别,最终严重干扰检测结果的准确性。

 

3、实验对照的设置

鉴于 CD25 呈连续性表达,而Foxp3 为低丰度表达蛋白,为确保结果的特异性与定量准确性,实验中建议设置荧光缺失一(Fluorescence Minus One, FMO)对照,以排除非特异性荧光对结果判读的影响。

 

 

四、四正柏Treg检测解决方案

 

基于多年流式经验,四正柏推出Treg检测一站式解决方案:

>覆盖人和小鼠的多个经典克隆号(如:MEL-14、PCH10、IM7)

>:匹配固定破膜体系,稳定检测核内Foxp3/T-bet

>Panel多轮兼容性验证,让Treg检测更精准、便捷

 

推荐产品:人和小鼠Treg专用流式检测试剂盒

 

 

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Human:

 

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Mouse:

 

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Foxp3检测专用固定、破膜液套装

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苏州四正柏生物科技有限公司拥有晶美生物、北京四正柏生物20多年的技术积累,现已成长为一家集生命科学研究、临床转化应用、流式技术服务、进出口平台四位一体的国家级高新技术企业。公司于2019年和2022年分别完成数千万元天使轮和Pre-A轮融资,拥有国家专利授权30余项,并承担国家科技部、北京市科委、深圳市科委等四项科研基金项目,获得苏州市高新区创业领军人才项目支持。公司已建成满足ISO9001:2015标准要求的全面质量管理体系,以及达到GMP规范要求的IVD生产线。公司已获医疗器械证260余件。四正柏企业愿景是发展成为全球生命科学和临床诊断领域最具竞争力的高新技术企业之一,植根中国,服务中国,面向世界。

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